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          白三葉草花葉病毒(CMV)ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟
          更新時(shí)間:2020-02-26   點(diǎn)擊次數(shù):1709次

           白三葉草花葉病毒(CMV)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟

            從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
            設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
            待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
            隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
            棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
            所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
            所有孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
          結(jié)果判斷

           繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

          試劑盒性能

          1.  準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。

          2.  靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于1.0 pmol/L。

          3.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。

          4.  重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

          5.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

           

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