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          人β淀粉樣蛋白1-40elisa檢測試劑盒實驗操作步驟
          更新時間:2020-07-22   點擊次數:1648次

          人β淀粉樣蛋白1-40elisa檢測試劑盒操作步驟

          1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
          2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
          3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
          4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
          5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
          6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
          7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
          8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
          9.在450nm波長處測定各孔的OD值。

          試劑盒性能
          1. 靈敏度:小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
          2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。
          3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

          結 果 判 斷 與 分 析
          1、儀器值:人β淀粉樣蛋白Aβ40于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

          2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的Aβ40標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的Aβ40含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

          3、檢測值范圍:0-80ng/ml

          4、敏感度: 0.1 ng/ml

           

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