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          elisa試劑盒白介素類酶活性和量能
          更新時間:2018-03-19   點擊次數:1172次

          elisa試劑盒白介素類酶制劑及其底物
          凡無毒性又能呈現有色化學反應的酶,原則上均可作為標記用。但作為標記抗體用的酶應滿足下列要求:
          (1)來源方便,易于純化;
          (2)比活性高,性質穩定;
          (3)酶活性和量能
          用簡單方法測定。目前在免疫酶技術中常用的酶為辣根過氧化物酶(HRP)和鹼性磷酸酶(AP),其次還有葡萄糖氧化酶,β-半乳糖苷酶、溶菌酶和蘋果酸脫氫酶等。
          由于辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)比活性高,穩定,分子量小,純酶容易制備,所以zui常用。HRP廣泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多個同功酶組成,分子量為40,000,等電點為PH3~9,酶催化的zui適PH因供氫體不同而稍有差異,但多在PH5左右。酶溶于水和58%以下飽和度硫酸銨溶液。HRP的輔基和酶蛋白zui大吸收光譜分別為403nm和275nm,一般以OD403nm /OD275nm的比值RZ(德文Reinheit Zahl)表示酶的純度。高純度的酶RZ值應在3.0左右(zui高可達3.4)。RZ值越小,非酶蛋白就越多。值得注意的是,elisa試劑盒白介素類純度并不表示酶活性,如當酶變性后,RZ值仍可不變。
          HRP的催化反應需要底物過氧化氫(H2O2)和供氫體(DH2)。供氫體多為無色的還原型染料,通過反應可生成有色的氧化型染料(D)。
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          elisa試劑盒白介素類

           

           

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